- 知乎 RT—PCR检测技术的原理是什么? RT—PCR检测技术的原理是什么? 进行qPCR,加入DNA聚合酶,buffer,引物,探针。 探针本身是一段DNA序列,能结合到病毒RNA反转录后的基因组上。 探针上的荧光基团和淬灭基团靠近,荧光基团无法发出荧光 PCR反应一轮,聚合酶合成DNA的时候路过探针会把探针切开,荧光基团和淬灭基团分开,荧光基团发出荧光。 如果是阴性样品,探针结合不上去,酶没办法切开探针,荧光基团不能发光。 RT-PCR 就是逆转录 PCR(reverse transcription PCR)或者称反转录 PCR,是聚合酶链式反应(PCR)的一种广泛应用的变形。